ENZIMA DE RESTRICCIÓN

ENZIMA DE RESTRICCIÓN HISTORIA: En 1978, el premio novel de fisiología y medicina fue otorgado a Daniel Nathans, Werner Arber, y  Hamilton O. Smith por el descubrimiento de las endonucleasas de restricción. Este descubrimiento  permitió el desarrollo de la tecnología de ADN recombinante que permite por ejemplo, la producción  a gran escala de insulina humana para diabéticos utilizado la bacteria E. Coli. Estas enzimas fueron descubiertas en bacterias, donde son usadas como un mecanismo de defensa  contra virus invasores debido a que estas enzimas cortan el DNA foráneo para ser degradado, mientras el  DNA propio es metilado para protegerlo contra la actividad de la enzima. DEFINICION: Las enzimas de restricción o endonucleasas de restricción son enzimas que cortan los enlaces fosfodiéster  de la doble hebra de DNA a partir de una secuencia especifica que reconocen, y ese punto donde la enzima  encuentra la secuencia de nucleótidos se conoce como sitio de restricción. Hay tres tipos de enzimas de restricción diferentes las cuales se diferencian básicamente en: Los tipos de secuencias que reconocen La forma en la que realizan el corte La estructura de la enzima Estas enzimas permiten cortar el DNA de hebra doble, donde reconocen secuencias palindrómicas,  ósea secuencias que se leen igual en ambas direcciones, y los cortes se pueden realizar de 2 maneras distintas: CORTES COHESIVOS CORTES ROMOS APLICACIONES DE LA ENZIMA DE RESTRICCION: Hacer mapa de restricción de un plasmado o bacteriofago Fragmentar DNA genomico para separación de electroforesis y southern blot Generación de fragmentos para ser usados como sondas marcadas en southern y northern blotting Generación de fragmentos para ser subclonados en los vectores apropiados, creación de DNA               recombinante FRASES: 1. En el proceso de creacion del DNA recombinante se utilizo una enzima de restricción la cual nos corto  la doble hebra en puntos concretos para poder realizar la integración del segmento de DNA extraño. 2. Un paso muy importante en el proceso de clonacion consiste en la generación de fragmentos de DNA  usando enzimas de restricción y posterior ligación de estos fragmentos a otra molécula vector. 3. Se utilizo una enzima de restricción en la fabricación de los diferentes plasmidos que se utilizaran durante la  investigación.